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网站首页技术支持 ◇ 免疫亲和柱的特点和操作的具体流程是怎样的
免疫性亲和柱的优点和操作使用的按照具体流程是该怎样的
  • 更新日期:2023-06-13     信息来源:本站      浏览次数:1149
    •     免疫系统亲和柱采用高特异性的单克隆抗体,能够简单高效的分离和纯化食品和饲料中的霉菌毒素,同时具有高渗透性、无需附加压力、低损耗等特点。测定的基础是抗原抗体反应,抗体连接在柱体内,样品经过提取、稀释,缓慢的通过亲和柱,在柱内河豚的毒素与抗体结合,之后洗涤除去没有被结合的其他无关物质。用洗脱液洗脱河豚的毒素,然后注入到分析仪器中用于检测。

          免疫亲和柱的特点:

          1、采用单克隆免疫技术,可以有效性地将待测成分分离出来,分离效率和回收率高,正确性和可靠性强

          2、实验稳定性好,重复性强。

          3、纯化过程简单快速,短时间即可处理大量样品

          4、实验设备轻便,自动化程度高,操作简单,对实验人员要求不高,可在小型试验场所使用。

          5、无需有毒溶剂,实验过程安全可靠。

          6、应用范围广,可处理多种复杂样品。

      免疫亲和柱

           免疫亲和柱的操作流程:

          ①提取:参照GB5009.118-2016中各法,对样品进行处理。

          ②净化:以GB5009.118-2016为例说明

          (1)柱子预处理:取出亲和柱,恢复至室温,将上端塞子取出,打开下端堵头,将柱内保存液流掉至高于凝胶上界面3-5mm处,停止流液。

          (2)加样:加入处理好的提取滤液,打开下端堵头,调节流速至1滴/秒,直至空气进入亲和柱中,弃去流出液。

          (3)淋洗:液体*排净后,用蒸馏水,淋洗,流速为1-2滴/秒,弃掉流出液,抽干。

          (4)洗脱:加入甲醇(色谱级),调节流速为1滴/秒,缓慢洗脱,收集全部洗脱液,用甲醇(色谱级)定容至(即为净化后的样品)。

          (5)衍生:将净化后样品在50℃下用氮气吹干,加入二甲基氨基吡啶溶液和蒽腈溶液,在涡旋混合器上混匀,50℃反应,在冰水中冷却后取出,50℃氮气吹干,用流动相溶解,待检测。

          ③检测

          净化后样品可直接用HPLC(高效液相色谱法)、GC-MS(气相色谱-质谱联用仪)、ELISA(酶联免疫吸附法)等方法进行检测。

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