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阳离子对微生物培养基的功用的工作原理和施用后的洗
  • 更新日期:2018-07-18     信息来源:本站      浏览次数:10915
    • 离子对试剂作用原理

           “加入离子对试剂后,它可以与待分析的物质结合成离子对而呈中性,这样非极性就表现出来,从而在色谱柱上有保留行为。”
            觉得离子对试剂很像胶黏剂,一头以离子吸引住待测物,另一头以碳链与固定性作用,从而把待测物保持在固定相上 。它的优点和缺点,都是因为这样的特性。
           “离子对分为正离子对和负离子对,分析酸性样品用正离子对试剂,分析碱性样品用负离子对试剂。
            离子对试剂可以吸附带负电荷的样品组分,负离子对试剂反之。
            离子对要考虑样品体系的复杂性和干扰物的特性,先用原则一般尽可能使用碳链短的先,这样可以避免强保留造成对柱子效能的影响,同时,浓度尽可能的低,以保证对柱子填料的稳定性影响小及清洗方便。”
            从碳链短的开始,从低浓度开始,不行再慢慢加。不过这次的使用经验是从碳链长度中等的开始,可以更快看到效果,节约摸索分析条件的时间。同时流动相PH值尽可能低以确保离子化程度。
       
      离子对试剂使用后清洗
           大家都强调离子对试剂要冲洗较长时间才能洗去。想想也知道那简直是一定的,使用前平衡了老半天呢,要是轻易就能洗去就怪了。
           对于多数离子对试剂,清洗还是比较简单的,平时的水——甲醇就能奏效,只是时间必须长点,2小时比较好。
           有些例子比较特殊:
          “如果用TBA的话应该需要好好洗洗柱子,因为这种胺类的东西不容易洗干净,且会慢慢溶解硅胶。 通常TBA是用0.1%的磷酸,(其中含有100mM 高氯酸钠)与甲醇 1:1 来洗。磷酸的作用是调节pH, 高氯酸钠可以把胺带下来,甲醇增加对有机物的溶解度。”
          “根据试验经验,SDS在酸中的溶解性较差,因为它是强碱弱酸盐,在酸性条件下可以生成不溶于水的弱酸十二烷基磺酸,但此酸在有机相中溶解性较好,所以即使在水相中有不溶解的SDS,在加入有机相后反而会使之溶解。所以在流动相中不含有其他盐时,*可以用比例较高的有机相水洗涤。”

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